Micropipet có thể đo thể tích chất lỏng rất nhỏ, nhưng thiết bị không thể bù cho thao tác thiếu nhất quán. Độ kín của tip, tốc độ pít-tông, góc cầm, độ sâu nhúng và thời gian chờ đều ảnh hưởng đến thể tích được phân phối.
Hướng dẫn này trình bày toàn bộ quy trình, từ chọn dải thể tích đến thải tip sau sử dụng. Nội dung phù hợp với chuẩn bị PCR, sinh học phân tử, hỗ trợ nuôi cấy tế bào, đào tạo và xử lý chất lỏng thường quy.
Trả lời nhanh
Chọn pipet nhỏ nhất có dải làm việc bao gồm thể tích mục tiêu. Cài thể tích mà không ép cơ cấu, gắn tip tương thích, làm ướt trước khi phù hợp, nhấn đến nấc thứ nhất, hút thẳng đứng và từ từ, chờ ngắn, sau đó nhả đều qua nấc thứ hai. Giữ góc, độ sâu, tốc độ và thời gian giống nhau giữa các lần lặp.
Trước khi bắt đầu: Chọn đúng dải thể tích
Độ chính xác thường khó kiểm soát hơn ở sát giới hạn thấp của pipet. Không dùng pipet thể tích lớn cho một lần chuyển rất nhỏ chỉ vì màn hình có thể hiển thị con số đó.
Micropipet điều chỉnh và hấp tiệt trùng toàn bộ của LifeGloria có 9 dải từ 0,1 µL đến 10 mL. Hãy chọn model nhỏ nhất vẫn bao phủ thoải mái thể tích cần thao tác.
- Kiểm tra pipet sạch và không hư hỏng
- Xác nhận thể tích nằm trong dải công bố
- Dùng tip tương thích, không nứt hoặc cong
- Ổn định nhiệt độ mẫu, tip và pipet khi phép đo có yêu cầu cao
Bước 1: Cài và khóa thể tích
Mở khóa trước khi điều chỉnh. Xoay vòng cài đặt nhẹ nhàng và không vượt giới hạn của model. Không cố ép cơ cấu ra ngoài dải.
Khi tăng từ thể tích nhỏ lên thể tích lớn, hướng dẫn sản phẩm khuyến nghị xoay hơi quá mục tiêu rồi quay trở lại đúng giá trị. Đọc đủ các chữ số và bật khóa thể tích trước khi thao tác lặp lại.
Bước 2: Gắn đầu tip đúng cách
Ấn pipet theo phương thẳng đứng vào tip tương thích với lực vừa đủ để tạo kín khí. Tip lỏng có thể hút không khí; lực quá mạnh có thể làm biến dạng tip, khó đẩy ra và gây mỏi tay.
- Tip phải thẳng và không lắc
- Không dùng tip nứt, cong hoặc nhiễm bẩn
- Thay tip giữa các mẫu có nguy cơ nhiễm chéo
- Dùng tip lọc hoặc vô trùng khi quy trình yêu cầu
Bước 3: Làm ướt trước khi phù hợp
Pre-wetting là hút và nhả cùng loại chất lỏng 2-3 lần trước lần đo chính thức. Việc này điều hòa bề mặt trong của tip và có thể tăng độ lặp lại ở thể tích nhỏ, chất dễ bay hơi hoặc chất lỏng bám nhựa khác nước.
Nếu phương pháp đã thẩm định yêu cầu tip khô hoặc chất lỏng làm ướt có thể gây carryover, hãy tuân theo phương pháp đó.
Bước 4: Hút chất lỏng
Nhấn đến nấc thứ nhất
Nhấn pít-tông êm đến điểm cản đầu tiên trước khi nhúng tip.
Nhúng đúng độ sâu
Giữ pipet gần thẳng đứng. Theo hướng dẫn sản phẩm: khoảng 1-2 mm cho ≤1 µL, 2-3 mm cho 1-100 µL, 2-4 mm cho 100-1000 µL và 3-6 mm cho thể tích lớn hơn.
Nhả chậm và chờ
Nhả pít-tông có kiểm soát. Chờ khoảng 1 giây với thể tích đến 1000 µL và lâu hơn ở mức mililit trước khi rút tip.
Bước 5: Phân phối chất lỏng
Chạm tip vào thành bình nhận với góc nhẹ. Nhấn đều đến nấc thứ nhất để nhả thể tích đo, rồi tiếp tục đến nấc thứ hai để thổi phần còn lại trong kỹ thuật pipet thuận.
Giữ pít-tông ở vị trí nhấn trong khi rút tip khỏi thành bình và chỉ nhả khi tip đã ra ngoài để tránh hút ngược.
Bước 6: Thải tip và bảo quản pipet
Đẩy tip đã dùng vào đúng thùng chất thải mà không chạm tay. Sau công việc, đặt pipet thẳng đứng trên giá. Không để chất lỏng trong tip hoặc cất pipet nằm ngang sau khi thao tác.
- Tháo tip trước khi cất
- Lau bên ngoài bằng phương pháp tương thích
- Ghi nhận sự cố rơi, tràn hoặc pít-tông bất thường
- Kiểm tra hiệu năng khi nghi ngờ độ chính xác
Các lỗi thao tác cần tránh
Xem danh sách chi tiết tại 8 lỗi pipet gây kết quả không chính xác.
- Cầm pipet nghiêng nhiều khi hút
- Nhả pít-tông quá nhanh gây bọt
- Nhúng tip quá sâu
- Thay đổi tốc độ hoặc thời gian chờ giữa các lần lặp
- Dùng một tip cho mẫu không tương thích
- Ép vòng cài thể tích vượt giới hạn
Thông tin sản phẩm LifeGloria
| Hạng mục | Thông tin |
|---|---|
| Dải thể tích | 9 model, từ 0,1 µL đến 10 mL |
| Hiển thị | Màn hình thể tích 4 chữ số |
| Bảo vệ cài đặt | Khóa thể tích một chạm |
| Tiệt trùng | Có thể hấp toàn bộ không cần tháo rời theo hướng dẫn |
| Chu trình trong hướng dẫn | 121°C, 1 bar, 20 phút; để nguội và khô trước khi dùng |
Câu hỏi thường gặp
Nấc thứ nhất của micropipet là gì?
Đó là điểm cản đầu tiên dùng để hút và nhả thể tích đã cài. Nấc thứ hai là vị trí thổi phần còn lại khi pipet thuận.
Có cần giữ micropipet thẳng đứng không?
Nên giữ gần thẳng đứng trong khi hút. Nghiêng pipet làm thay đổi điều kiện thủy tĩnh và giảm tính nhất quán.
Tip nên nhúng sâu bao nhiêu?
Dùng độ sâu nông theo thể tích, ví dụ 2-3 mm cho 1-100 µL và 2-4 mm cho 100-1000 µL theo hướng dẫn LifeGloria.
Một pipet có bao phủ mọi thể tích không?
Không. Nên dùng nhiều dải để mỗi thể tích nằm thoải mái trong vùng làm việc được chỉ định.
Kết luận
Pipet chính xác cần một chuỗi thao tác lặp lại được. Hãy ghép đúng dải và tip, cài thể tích đúng, hút thẳng đứng và chậm, nhả qua đúng nấc và giữ thời gian nhất quán. Khi kết quả thay đổi bất thường, kiểm tra cả kỹ thuật lẫn hiệu năng thiết bị.
Tài nguyên LifeGloria liên quan
Bạn cần hỗ trợ lựa chọn thiết bị phòng thí nghiệm? Liên hệ LifeGloria.
Lưu ý quan trọng: Luôn tuân thủ hướng dẫn sử dụng thiết bị, SOP phòng thí nghiệm, giới hạn của ống và rotor, cùng các yêu cầu an toàn tại địa phương.
