ไมโครไพเพตสามารถวัดของเหลวปริมาตรน้อยได้อย่างละเอียด แต่ตัวเครื่องไม่สามารถชดเชยเทคนิคที่ไม่สม่ำเสมอได้ ความแน่นของทิป ความเร็วของลูกสูบ มุม ความลึก และเวลารอล้วนมีผลต่อปริมาตรที่จ่าย
คู่มือนี้อธิบายลำดับการใช้งานตั้งแต่เลือกช่วงปริมาตรจนถึงทิ้งทิป เหมาะสำหรับ PCR ชีววิทยาระดับโมเลกุล งานเตรียมตัวอย่าง และห้องปฏิบัติการทั่วไป
คำตอบแบบสั้น
เลือกไมโครไพเพตขนาดเล็กที่สุดที่ครอบคลุมปริมาตรเป้าหมาย ตั้งปริมาตรโดยไม่ฝืนกลไก ใส่ทิปที่เข้ากันได้ ทำ pre-wet เมื่อเหมาะสม กดถึงจุดหยุดแรก ดูดในแนวตั้งอย่างช้า ๆ รอสั้น ๆ แล้วจ่ายอย่างนุ่มนวลจนถึงจุดหยุดที่สอง รักษามุม ความลึก ความเร็ว และเวลาให้สม่ำเสมอทุกครั้ง
ก่อนเริ่ม: เลือกช่วงปริมาตรของไมโครไพเพตให้ถูกต้อง
การทำงานใกล้ค่าต่ำสุดของช่วงมักควบคุมความแม่นยำได้ยากกว่า อย่าใช้ไพเพตปริมาตรสูงกับงานปริมาตรต่ำเพียงเพราะหน้าจอสามารถแสดงค่าได้
ไมโครไพเพตปรับปริมาตรและนึ่งฆ่าเชื้อได้ทั้งชิ้นของ LifeGloria มี 9 ช่วง ครอบคลุม 0.1 µL ถึง 10 mL ควรเลือกช่วงที่เล็กที่สุดแต่ยังครอบคลุมปริมาตรเป้าหมายได้อย่างสบาย
- ตรวจว่าเครื่องสะอาดและไม่มีความเสียหาย
- ยืนยันว่าค่าที่ต้องการอยู่ในช่วงที่ระบุ
- ใช้ทิปที่เข้ากันได้และไม่ชำรุด
- ควบคุมอุณหภูมิของตัวอย่าง ทิป และเครื่องเมื่อเป็นงานสำคัญ
ขั้นตอนที่ 1: ตั้งค่าและล็อกปริมาตร
ปลดล็อกก่อนปรับค่า หมุนวงแหวนอย่างนุ่มนวลและหยุดภายในช่วงของรุ่น ห้ามฝืนให้ต่ำหรือสูงกว่าค่าที่กำหนด
เมื่อเพิ่มปริมาตรจากค่าต่ำ คู่มือแนะนำให้หมุนเกินเป้าหมายเล็กน้อยแล้วหมุนกลับมา อ่านตัวเลขทุกหลักและล็อกปริมาตรก่อนทำงานซ้ำ
ขั้นตอนที่ 2: ใส่ทิปให้แน่นพอดี
กดไพเพตลงในทิปในแนวตั้งด้วยแรงเท่าที่จำเป็นเพื่อให้ซีลอากาศสนิท ทิปหลวมอาจดูดอากาศ ส่วนแรงมากเกินไปอาจทำให้ทิปเสียรูป ถอดยาก และเพิ่มความล้าของมือ
- ทิปต้องตรงและไม่โยก
- ห้ามใช้ทิปแตก งอ หรือปนเปื้อน
- เปลี่ยนทิประหว่างตัวอย่างที่เสี่ยงปนเปื้อนข้าม
- เลือกทิปกรองหรือทิปปลอดเชื้อตามวิธีทดสอบ
ขั้นตอนที่ 3: ทำ Pre-Wet เมื่อเหมาะสม
Pre-wet คือการดูดและจ่ายของเหลวชนิดเดียวกับตัวอย่าง 2-3 ครั้งก่อนวัดจริง ช่วยปรับสภาพผิวด้านในและเพิ่มความสม่ำเสมอ โดยเฉพาะปริมาตรต่ำ ของเหลวระเหยง่าย หรือของเหลวที่เกาะพลาสติก
หากวิธีที่ผ่านการตรวจสอบกำหนดให้ใช้ทิปแห้ง หรือของเหลวที่ใช้ล้างอาจทำให้เกิด carryover ให้ทำตามวิธีนั้น
ขั้นตอนที่ 4: ดูดของเหลว
กดถึงจุดหยุดแรก
กดลูกสูบอย่างนุ่มนวลถึงแรงต้านจุดแรกก่อนจุ่มทิป
จุ่มในความลึกที่เหมาะสม
ถือเครื่องเกือบตั้งตรง คู่มือระบุประมาณ 1-2 mm สำหรับ ≤1 µL, 2-3 mm สำหรับ 1-100 µL, 2-4 mm สำหรับ 100-1000 µL และ 3-6 mm สำหรับปริมาตรสูงกว่า
ปล่อยช้าและรอสั้น ๆ
ปล่อยลูกสูบด้วยความเร็วคงที่ รอประมาณ 1 วินาทีสำหรับปริมาตรถึง 1000 µL และนานขึ้นสำหรับระดับมิลลิลิตร ก่อนยกทิปออก
ขั้นตอนที่ 5: จ่ายของเหลว
แตะปลายทิปกับผนังภาชนะรับในมุมเล็กน้อย กดถึงจุดหยุดแรกเพื่อจ่ายปริมาตรที่วัด แล้วกดต่อถึงจุดหยุดที่สองเพื่อเป่าของเหลวคงค้างสำหรับการปิเปตแบบ forward
ค้างลูกสูบไว้ขณะถอนทิปจากผนัง แล้วค่อยปล่อยเมื่อทิปพ้นภาชนะ เพื่อไม่ให้ของเหลวถูกดูดกลับ
ขั้นตอนที่ 6: ทิ้งทิปและจัดเก็บ
กดปุ่ม eject ลงในภาชนะทิ้งที่เหมาะสมโดยไม่จับทิปด้วยมือ หลังใช้งานให้วางไพเพตตั้งตรงบนขาตั้ง ไม่เก็บเครื่องนอนราบหลังจัดการของเหลว
- ถอดทิปก่อนจัดเก็บ
- เช็ดภายนอกด้วยวิธีที่เข้ากันได้
- บันทึกเหตุเครื่องตก ของเหลวหก หรือการกดที่ผิดปกติ
- ตรวจสอบความแม่นยำเมื่อสงสัยประสิทธิภาพ
ข้อผิดพลาดที่ควรหลีกเลี่ยง
ดูรายการแบบละเอียดได้ที่ 8 ข้อผิดพลาดในการปิเปตที่ทำให้ผลคลาดเคลื่อน
- เอียงไพเพตมากขณะดูด
- ปล่อยลูกสูบเร็วจนเกิดฟอง
- จุ่มทิปลึกเกินไป
- เปลี่ยนความเร็วหรือเวลารอระหว่างซ้ำ
- ใช้ทิปเดียวกับตัวอย่างที่ไม่ควรปะปน
- ฝืนวงแหวนปรับปริมาตรเกินช่วง
ข้อมูลผลิตภัณฑ์ LifeGloria
| รายการ | ข้อมูล |
|---|---|
| ช่วงปริมาตร | 9 รุ่น ครอบคลุม 0.1 µL ถึง 10 mL |
| หน้าจอ | แสดงปริมาตร 4 หลัก |
| การป้องกันค่าเปลี่ยน | ล็อกปริมาตรแบบปุ่มเดียว |
| การฆ่าเชื้อ | นึ่งทั้งชิ้นได้โดยไม่ถอดประกอบตามคู่มือ |
| รอบนึ่งในคู่มือ | 121°C, 1 bar, 20 นาที และปล่อยให้เย็นและแห้งก่อนใช้ |
คำถามที่พบบ่อย
จุดหยุดแรกของไมโครไพเพตคืออะไร
เป็นจุดแรงต้านแรกสำหรับดูดและจ่ายปริมาตรที่ตั้งไว้ ส่วนจุดหยุดที่สองใช้เป่าของเหลวคงค้างในการจ่ายแบบ forward
ต้องถือไพเพตตั้งตรงหรือไม่
ควรถือเกือบตั้งตรงระหว่างดูด การเอียงเปลี่ยนสภาวะความดันและลดความสม่ำเสมอ
ควรจุ่มทิปลึกเท่าใด
ใช้ความลึกตื้นตามปริมาตร เช่น 2-3 mm สำหรับ 1-100 µL และ 2-4 mm สำหรับ 100-1000 µL ตามคู่มือ LifeGloria
ไพเพตหนึ่งตัวใช้ได้ทุกปริมาตรหรือไม่
ไม่ได้ ควรมีหลายช่วงเพื่อให้แต่ละปริมาตรอยู่ในช่วงทำงานที่เหมาะสม
สรุป
การปิเปตที่แม่นยำต้องมีลำดับที่ทำซ้ำได้ เลือกช่วงและทิปให้เหมาะ ตั้งค่าอย่างถูกต้อง ดูดในแนวตั้งและช้า จ่ายผ่านจุดหยุดที่ถูกต้อง และรักษาเวลาให้คงที่ หากผลเปลี่ยนโดยไม่ทราบสาเหตุให้ตรวจทั้งเทคนิคและตัวเครื่อง
แหล่งข้อมูล LifeGloria ที่เกี่ยวข้อง
ต้องการความช่วยเหลือในการเลือกอุปกรณ์ห้องปฏิบัติการหรือไม่ ติดต่อ LifeGloria.
ข้อสำคัญ: ปฏิบัติตามคู่มือเครื่องมือ SOP ของห้องปฏิบัติการ พิกัดของหลอดและโรเตอร์ รวมถึงข้อกำหนดด้านความปลอดภัยในพื้นที่เสมอ
